LC梯度色谱仪分析中色谱峰展宽的柱外因素

　　LC梯度色谱仪分析中色谱峰展宽的柱外因素有进样器、检测器和连接管中的死体积。采用细内径的管路，尽量减小连接管路的长度，采用死体积小的检测器，采用合适的进样方式和技术，可降低柱外效应。

　　一、采用细内径的管路，尽量减小连接管路的长度。

　　若管路内径减小，其长度可增加。若管路内径增大，其长度要缩短。内径0.25mm连接管应为100mm左右或更短。内径0.5mm连接管，长度应在10mm以下。

　　连接管内径减小，管内压力降较大，泵压会上升。

　　二、采用死体积小的检测器。

　　一般检测池内色谱峰展宽小于总的色谱峰展宽的10%时，要求检测池体积小于14μL，一般为5～8μL。

　　三、LC梯度色谱仪采用合适的进样方式和技术。

　　进样有时是色谱峰展宽的主要原因，这取决于进样体积和进样方式。

　　进样体积越大，柱外效应越大。

　　进样方式一般有阀进样与注射器进样两种。阀进样允许进样体积大，注射进样允许进样体积小。进样体积还与溶质k值有关，溶质k值越大，允许进样的体积越大。

　　LC梯度色谱仪不分流进样时，在气化室中气化的含有大量溶剂的样品不可能瞬间进入毛细管柱，溶剂峰会严重拖尾，使早流出组分的色谱峰被掩盖在溶剂拖尾峰中，从而使分析变得困难甚至不可能。这种由于进样时间延长引起的色谱峰展宽称为时间性谱带展宽。时间性谱带展宽可采用溶剂效应和热浓缩来抑制。

　　所谓溶剂效应是指进祥时柱温比溶剂沸点低15～30℃，当不分流进样完毕后，打开分流阀，用载气吹扫气化室中残留的溶质和溶剂，同时柱温开始升高，溶剂开始蒸发，溶质以窄的起始谱带开始进行分离的过程。

　　LC梯度色谱仪所谓热浓缩是指进样时柱温比溶质沸点低很多，使溶质冷凝在柱头上，同时柱温比溶剂沸点高很多，使溶剂保留为气态的过程。在此条件下不会出现溶剂效应。如果柱温比溶质沸点低150℃以上，热浓缩会有效地把溶质浓缩到很窄的区带上。