对于HPLC来说,该如何计算死体积呢。
死体积(dead volume,V0)——由进样器进样口到检测器流动池未被固定相所占据的空间。它包括4部分:进样器至色谱柱管路体积、柱内固定相颗粒间隙(被流动相占据,Vm)、柱出口管路体积、检测器流动池体积。其中只有Vm参与色谱平衡过程,其它3部分只起峰扩展作用。为防止峰扩展,这3部分体积应尽量减小。
死时间(dead time,t0)——不保留组分的保留时间。即流动相(溶剂)通过色谱柱的时间。
测量系统死体积通常需要通过实验进行测量,常用方法是通过进一针和色谱柱固定相没有任何作用的特殊溶液(方法中会有规定,例如:尿嘧啶,少量NaNO3或甲醇溶于流动相得到的溶液,也有直接用100%色谱纯甲醇进样的情形)时,就会得到一个色谱峰,由此峰可以测得死时间(t0),这就是t0的实测结果。
然后通过计算得到系统死体积:死体积(V0) = 死时间t0×流动相的流速F。
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