大豆脂肪酸组分的气相色谱分析

　　摘要:探讨了大豆脂肪酸快速气相色谱分析方法，不需从原料中提取脂质，直接将磨碎原料中的脂质皂化、甲脂化后， 利用色谱柱进行气相色谱分析。结果表明：软脂酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸的出峰时间依次为 6 57、7. 83 8. 73 & 86、9. 06 mi。这种方法的优点是快速、操作方便、节省药品；即使在较低的杂交世代样品很少，用普 通法不易提取脂质时，此法也能顺利地完成分析工作。 关键词：大豆;脂肪酸;气相色谱分析
　　　　解浸提，取上清甲酯化，采用醇钾作为甲酯化试剂， 酯化反应速度快并酯化*，甲酯化后离心取上清 用HP5色谱柱进行GC分析，获得了 一种快速检测 大豆脂肪酸组分的气相色谱分析法。
　　材料与方法
　　仪器和试剂
　　气相色谱。 标准品：软脂酸（> 99% ）、硬脂酸（> 99% ）、亚 油酸、油酸、亚麻酸（>99. 3%,购于Sgm a公 司 ）。
　　试齐…正己烷（> 97% , AR）甲醇（
　 1. 2甲酯化试剂制备
　　取分析纯氢氧化钾2 244 g放入带磨口的棕色 试剂瓶中，取100 mL甲醇沿玻璃棒注入试剂瓶中，
　　大豆油脂是由脂肪酸和甘油组成，其中脂肪酸 占油脂总量的90%以上，是油脂的主要成分。大豆 油脂的特性与其所含不饱和脂肪酸的组成与配比 有关。大豆油脂不饱和脂肪酸中所含的亚油酸 （18： 2）和亚麻酸（18： 3）是哺乳动物自身不能合成 的，该重要营养物质必须从植物油脂中获得。大 豆是亚油酸含量较高的油用作物，可防止血清中胆 固醇的增加和沉积，软化血管，对防治高血压和心 血管疾病均有重要作用。亚麻酸对维持细胞膜的 稳定性和调节细胞膜适应性具有极其重要的生物 学意义。大豆脂肪酸均采用色谱分析法测定，但不同研究者所采用的进样样品前处理方法和酯化试 剂不同。前人分析大豆脂肪酸组分，通常采用索氏 抽提法或二氧化碳临界萃取法先提取脂肪提 取脂肪要浪费大量的时间，提取脂肪后再使用有机 溶剂溶解脂肪。现对Ssana等方法进行了改进， 将磨碎原料中的脂质不进行提取直接用正己烷溶
　　　　用玻璃棒搅拌3mn在室温下反应2 h后，待用，如 不用立即放于4。C冰箱中保存，可使用3 d。 1. 3样品处理
　　称取0 33g已粉碎的大豆样品于L 5mL的离 心管中，加入ImL正己烷，充分振摇0. 5min室温 放置5 I;然后将上清液移入另一只1 5 mL离心管 中，在上清离心管加入已配好的0 5mL甲酯化试 剂进行甲酯化反应，振荡2min在室温下反应1h。 移上清，在6 000 I- mil- 1离心机离心5 m in然后 上清进样GC分析。 14 GC分析条件
　　色谱柱 HP519091J-413 （ 30m x 320Um x 0. 25Um）;进样量1UL，分流进样方式，分流比50: 1; 进样口温度：220°C；载气：Nq 45 mL ‘ mn ?氢气： 40 mL‘ min-1;空气 450mL ‘ mh- 1。程序升温： 150°C下保持Imin然后以20°0 m if1的速率升 至200°C，保持3 min再以10°C ‘ min-1的速率升至 250。C，保持2 mi。检测器：氢火焰离子检测器 （FD），检测器温度恒温275。C。
　　结果与分析
　　与传统方法比较
　　运用毛细管气相色谱进行分离，经甲酯化的脂 肪酸成分，通过色谱数据工作站689Q利用峰面积 归一化法，测得各化学组分在脂肪酸中的百分含 量。该方法快速、操作方便、节省药品；即使在较低 的杂交世代样品很少，用普通法不易提取脂质时， 此法也能顺利地完成分析工作。